title ru

Архив журнала > 2013 > № 4, июль-август

ВЛИЯНИЕ Са2+ НА КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ ДЫХАНИЯ
МИТОХОНДРИЙ IN SITU АЦИНАРНЫХ ПАНКРЕАЦИТОВ

Б. А. Манько, В. В. Манько

Львовский национальный университет имени Ивана Франко, Украина;
e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Исследована зависимость скорости дыхания пермеабилизированных ацинарных панкреацитов крыс от концентрации в среде субстратов цикла Кребса при различных [Са2+] – 10-8–10-6 М. Панкреациты пермеабилизировали дигитонином в расчете 50 мкг на 1 млн клеток. Скорость дыхания определяли полярографическим методом с использованием электрода Кларка при окислении сукцината, а также пирувата или глутамата в присутствии малата. Параметры уравнения Михаэлиса–Ментен рассчитывали методом Корниш-Боудена или с использованием координат Иди–Хофсти, а параметры уравнения Хилла – координат {v; v/[S]h}. В исследуемом диапазоне [Сa2+] кинетическая зависимость дыхания окисления пирувата описывается уравнением Михаэлиса–Ментен, а окисления сукцината или глутамата – уравнением Хилла с h = 1,11–1,43 и 0,50–0,85 соответственно. Кажущаяся константа полуактивации дыхания (K0,5) не испытывала существенных изменений в исследуемом диапазоне [Ca2+] и при 10-7 М Са2+ составила для сукцината 0,90 ± 0,06 мМ, пирувата – 0,096 ± 0,007 мМ, глутамата – 0,34 ± 0,03 мМ. Максимальная скорость дыхания Vmax при окислении пирувата увеличилась от 0,077 ± 0,002 до 0,119 ± 0,002 и 0,140 ± 0,002 нмоль О2/(с·млн клеток) вследствие повышения [Ca2+] от 10-7 до 5?10-7 или 10-6 М соответственно. При окислении сукцината или глутамата ионы Ca2+ существенно не влияют на Vmax. Следовательно, повышение [Ca2+] стимулирует дыхание митохондрий ацинарных панкреацитов в условиях in situ при окислении экзогенного пирувата (вследствие, очевидно, активации пируватдегидрогеназы), но не сукцината или глутамата.

Ключевые слова: ацинарные панкреациты, митохондрии in situ, дыхание, Са2+, пируват, сукцинат, глутамат, кинетика, уравнение Хилла, уравнение Михаэлиса–Ментен.

Оригинал статьи на украинском языке доступен для скачивания в формате PDF.

© Украинский биохимический журнал