Aрхив журнала > 2009 > №4, июль-август |

Цитотоксичность субъединицы в дифтерийного токсина по отношению к гистоцитарной лимфоме человека u937.

Короткевич Н. В. | Лабынцев А. Ю. | Кабернюк А. А. | Е. С. Олейник | Романюк С. И. | Колибо Д. В. | Комиссаренко С. В.

Субъединица В дифтерийного токсина (ДТ) ответственна за его связывание с рецептором клеток и за транслокацию каталитической субъединицы А через мембрану эндосомы в цитозоль клетки. Рецептором для ДТ и его В‑субъединицы является мембранозаякоренный предшественник гепаринсвязывающего фактора роста, подобного эпидермальному фактору роста (pro-HB-EGF), который под действием металлопротеиназ может переходить в растворимую форму (sHB-EGF). Последняя является потенциальным митогеном для многих типов клеток. Поскольку свободная В-субъединица ДТ не обладает каталитической активностью, считается, что она не может быть токсичной, хотя ее влияние на клетки in vitro остается неисследованным. Целью нашей работы было, используя рекомбинантные аналоги В-субъединицы ДТ, изучить ее влияние на жизнеспособность клеток, чувствительных к дифтерийному токсину. Показано, что рекомбинантный аналог В-субьединицы ДТ уже при концентрации 12,8Г—10-7 М оказывает цитотоксическое действие на культуру клеток гистоцитарной лимфомы человека U937, которая экспрессирует значительное количество sHB-EGF. Кроме того, подобной цитотоксичностью также обладает химерный протеин на основе В-субъединицы и усиленного зеленого флуоресцентного протеина(ЕGFP), хотя сам рекомбинантный ЕGFP не влияет на жизнеспособность исследуемых клеток. Цитотоксический тест с использованием трипанового синего или пропидия йодида исключает прямое влияние исследуемых протеинов на целостность плазматической мембраны клеток из-за способности В-субъединицы к порообразованию. Таким образом, нами выдвинута гипотеза, согласно которой реализация цитотоксического влияния рекомбинантной субъединицы В ДТ и ее производного на культуру клеток U937 происходит путем ингибирования митогенной активности sHB-EGF. Такое ингибирующее влияние может приводить к индукции апоптоза.

 

Получено: 2009-08-25

Опубликовано на сайте: 2009-08-08

© Украинский биохимический журнал