title ru

Архив журнала > 2008 > № 5, сентябрь-октябрь

ДЕЙСТВИЕ НИТРИТ-АНИОНОВ И ПЕРОКСИДА ВОДОРОДА
НА ПОВЕРХНОСТНЫЕ СВОЙСТВА ПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ
МЕМБРАНЫ ГЛАДКОМЫШЕЧНЫХ КЛЕТОК

Ю. В. Данилович, С. А. Карахим

Институт биохимии им. А. В.?Палладина НАН Украины, Киев;
e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

В присутствии везикулированных препаратов сарколеммы (около 70% обращенных цитоплазматической стороной внутрь) флуоресценция АНС – 1-(фениламино)-8-сульфонафталина – повышается более, чем в 10 раз. При увеличении концентрации нитрита натрия и пероксида водорода от 1 до 5 мкМ флуоресценция зонда уменьшается. Гашение флуоресценции АНС при действии нитрит-анионов, очевидно, связано с химической модификацией положительно заряженных поверхностных мембранных групп (аминных и сульфгидрильних). Это приведет к снижению количества локальных положительных зарядов на мем­бране, соответствующего снижения связывания АНС с мембраной и гашению флуоресценции. Пероксид водорода способен окислять поверхностные SH-группы, которые несут частичный положительный заряд. Следовательно и в этих условиях может наблюдаться снижение общего количества фиксированных положительных зарядов на мембране, уменьшение связывания АНС с сарколеммой и соответствующее гашение флуоресценции. Исследованная и рассчитанная методом «ионного удара» поверхностная плотность зарядов везикулированных препаратов составляет 2,3?± 0,1 мКл/м2. При действии 50 мкМ нитрита натрия и пероксида водорода она уменьшается до 2,0 ± 0,1 мКл/м2 и 1,7 ± 0,07 мКл/м2 соответственно. Менее эффективное действие NaNO2 может быть обусловлено влиянием Na+ на поверхностное поле мембраны. Для подтверждения полученных нами данных мы использовали метод лазерно-корреляционной спектроскопии, то есть регистрировали среднее значение гидродинамического диаметра (ГД) везикул и их распределение по размерам. Средний ГД составляет в контроле 327 ± 16 нм, а наиболее часто встречаемый в популяции – 291 ± 11 нм. Добавление к системе нитрит-анионов в повышающейся концентрации приводит к существенному снижению ГД как во всей мембранной популяции в целом, так и в плазмалемных везикулах. Аналогичные результаты получены также в экспериментах с Н2О2. В присутствии специфических модификаторов сульфгидрильних и аминных групп поверхности мембраны (ДТТ и ТНБС соответственно) снижение ГД под действием нитрит-анионов и пероксида водорода или не наблюдается вообще или существенно уменьшается. Следовательно, уменьшение ГД везикул в нашей системе при действии исследуемых соединений может быть связано с химической модификацией аминных или/и сульфгидрильних групп поверхности мембраны, что дополняет и подтверждает опыты с АНС. Возможное уменьшение плотности поверхностных позитивных зарядов при условии действия на мембрану окислов азота и пероксида водорода может привести к усилению взаимодействия катионов с мембраной и влиять на их рецепцию и транспорт.

Ключевые слова: поверхностный потенциал мембраны, АНС, окислы азота, пер­оксид водорода, метод лазерно-корреляционной спектроскопии, миометрий.

Оригинал статьи на украинском языке доступен для скачивания в формате PDF.

© Украинский биохимический журнал