ОБРАЗОВАНИЕ КОМПЛЕКСА МЕЖДУ РЕКОМБИНАНТНЫМ БЕЛКОМ VPg ВИРУСА КАРТОФЕЛЯ Y И ГЕТЕРОЛОГИЧНЫМИ ЭУКАРИОТИЧЕСКИМИ ФАКТОРАМИ ИНИЦИАЦИИ ТРАНСЛЯЦИИ eIF4E (Л.И. Строковская, Р.Гржела, Я.Хробочек, И.М. Кихно, Л.И. Чащина, А.П. Соломко)

title ru

Архив журнала > 2007 > № 1, январь-февраль

ОБРАЗОВАНИЕ КОМПЛЕКСА МЕЖДУ РЕКОМБИНАНТНЫМ

БЕЛКОМ VPg ВИРУСА КАРТОФЕЛЯ Y И ГЕТЕРОЛОГИЧНЫМИ

ЭУКАРИОТИЧЕСКИМИ ФАКТОРАМИ ИНИЦИАЦИИ

ТРАНСЛЯЦИИ eIF4E

Л. И. Строковская¹, Р. Гржела², Я. Хробочек³, И. М. Кихно¹,

Л. И. Чащина¹, А. П. Соломко¹

¹Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины, Киев;

e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.;

²Институт биохимии и биофизики ПАН, Варшава;

³Институт структурной биологии, Гренобль, Франция

Геномы некоторых РНК-содержащих вирусов не имеют кэп-структуры, вместо этого их 5??конец ковалентно связан с вирусным белком VPg. Комплексообразование между VPg и клеточными факторами инициации трансляции (eIF) интенсивно изучается в контексте модели, согласно которой этот комплекс вовлечен в инициацию трансляции вирусных мРНК и одновременное блокирование трансляции собственных белков инфицированной клетки. В настоящем исследовании VPg вируса картофеля Y был проэкспрессирован в бактериальной и бакуловирусной системе с целью изучения его способности связываться с eIF4E (и его изоформой) пшеницы.Очищенные рекомбинантные eIF4E и eIF(iso)4E были идентифицированы как партнеры по связыванию с очищенным рекомбинантным VPg в эксперименте in vitro c использованием метода аффинной хроматографии, а также в эксперименте in vivo, когда рекомбинантный VPg и изоформы eIF4E экспрессировали одновременно в клетках насекомых с последующей очисткой комплекса при помощи аффинной хроматографии. Кроме того было показано, что VPg вируса картофеля Y также формировал комплекс с эндогенным eIF4E клеток насекомых. Взаимодействие VPg вируса картофеля Y с eIF4E пшеницы (непермиссивного растения для вируса картофеля) и, в особенности, взаимодействие с таким эволюционно отдаленным белком, как eIF4E насекомых, свидетельствует о консервативности общих структурных элементов eIF4E, вовлеченных в формирование комплекса с VPg.

Ключевые слова: белок-белковые взаимодействия, вирусы растений, eIF4E, VPg.

Оригинал статьи на русском языке доступен для скачивания в формате PDF.