ИММОБИЛИЗАЦИЯ ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫХ АНТИТЕЛ МЫШИ ДЛЯ АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЦЕЛЛЮЛОЗО-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА (П.В. Гильчук, Г.Л. Волков)

title ru

Архив журнала > 2006 > № 4, июль-август

ИММОБИЛИЗАЦИЯ ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫХ АНТИТЕЛ МЫШИ

ДЛЯ АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ

ЦЕЛЛЮЛОЗО-СВЯЗЫВАЮЩЕГО БЕЛКА

П. В. Гильчук¹, Г. Л. Волков²

¹Киевский национальный университет имени Тараса Шевченкo, Украина;

²Институт биохимии им. А. В. Палладина НАН Украины, Киев;

е-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Описан предложенный авторами лабораторный метод получения аффинного иммуносорбента для хроматографической очистки рекомбинантного интерферона ?2b человека (IFN-?2b), который основан на ориентированной и нековалентной иммобилизации рекомбинантных фрагментов антител на целлюлозном носителе. На основе ДНК последовательностей одноцепочечных антител (ScFv) против IFN-?2b человека и целлюлозосвязывающего домена (CBD) из целлюлозолитического комплекса Clostridium thermocellum сконструирован гибридный белок ScFv-CBD. После экспрессии ScFv-CBD в Escherichia coli и выделения целевого белка в функционально активной форме была проведена его биоаффинная иммобилизация на разных типах целлюлозных носителей. Кристаллическая микрогранулированная целлюлоза с иммобилизированным ScFv-CBD использована как аффинный иммуносорбент для очистки рекомбинантного IFN-?2b человека непосредственно из осветленного лизата клеток E. coli.

Ключевые слова: одноцепочечные антитела, иммуноаффинная хроматография, иммобилизация белка, гибридный белок.

Оригинал статьи на английском языке доступен для скачивания в формате PDF.