Архів журналу > 2006 > № 6, листопад-грудень
В експериментах, виконаних на плазматичних мембранах клітин міометрія, оброблених 0,1% м розчином дигітоніну, досліджували вплив калікс[4]аренів С-97 і С-107 (наведено шифри цих сполук) на Nа+,К+-АТР-азну активність за наявності в інкубаційному середовищі серцевого глікозиду уабаїну. Показано, що каліксарени в концентрації 100 мкМ значно інгібують (на 97–98%) активність Na+,K+-АТР-ази, практично не впливаючи на базальну Mg2+-АТР-азу. Вони значно ефективніше, ніж уабаїн, пригнічують ферментативну активність натрієвої помпи: за їхньої дії значення константи інгибування I0,5 менше 0,1 мкМ, тоді як для уабаїну воно становить 15–25 мкМ. Для пригнічувальної дії обох інгібіторів, характерне явище негативної кооперативності: величина коефіцієнта Хілла nH?=?0,3–0,5?<?1. Модельна сполука М-3 (0,1 мкМ – 4 мМ) – фрагмент каліксарену С-107 – практично не впливає на активність обох ферментів. Отже, вплив каліксарену С-107 на активність Na+,K+-АТР-ази обумовлено кооперативною дією двох фрагментів М-3 і ефектом каліксаренової чаші, а не лише дією фрагмента М-3. Каліксарени С-97 (40 нМ) і С-107 (60 нМ), концентрації яких відповідають значенням I0,5, істотно стимулюють інгібувальну дію уабаїну на активність Na+,K+-АТР-ази мембран. У разі сумісного використання уабаїну та обох каліксаренів спостерігається їхній неаддитивний ефект на Nа+,К+-АТР-азну активність. Каліксарен С-97, внесений до середовища інкубації в концентрації 10 нМ, гальмує активність Na+,K+-АТР-ази стосовно контролю і підвищує спорідненість ферменту до глікозиду: величини уявної константи інгібування становлять відповідно 21,0 ± 5,2 і 5,3 ± 0,7 мкМ. Дійшли висновку, що високоефективні інгібітори Na+,K+-АТР-азної активності каліксарени С-97 і С-107 посилюють (на прикладі каліксарену С-97) ефект класичного інгібітора натрієвоі помпи уабаїну, збільшуючи до нього спорідненість ферменту.
Ключові слова: Nа+,К+-АТР-аза, Mg2+-АТР-аза, плазматична мембрана, уабаїн, гладеньком’язові клітини, міометрій, ферментативний гідроліз АТР, кінетичні властивості АТР-ази, комплексони, каліксарени, метиленбісфосфонові кислоти, амінофосфонові кислоти.
Оригiнал статтi українською мовою доступний для зкачування в форматi PDF.
© Український бiохiмiчний журнал