Архiв журналу > 2004 > № 6, листопад-грудень

Кінетичні характеристики Са2+, Mg2+-АТР-аз клітин підщелепної слинної залози щурів

Ю. О. Вац, О. О. Пентюк, Н. В. Федірко

Исследовали кинетические свойства Са2+,Mg2+-АТР-аз мембран ацинарных клеток подчелюстной слюнной железы крыс. Установлено, что кинетика гидролиза АТР, катализируемого Са2+-зависимыми Mg2+-активируемыми АТР-азами этих клеток, в диапазоне времени до двух минут соответствует реакции первого порядка. Начальная скорость, максимальное количество продукта и характеристическое время реакции ? Са2+-зависимого гидролиза АТР, катализируемого везикулами плазматической и ретикулярной мембран, составляют 1,8 ± 0,4 и 1,6 ± 0,2 мкмоль Рі/мин на 1 мг белка; 7,5 ± 1,3 и 1,4 ± 0,2 мкмоль Рі /мг белка; 4,1 ± 0,7 и 1,1 ± 0,1 мин соответственно. Идентифицированы высоко- и низкоаффинные центры связывания АТР и Са2+ с Са2+, Mg2+-АТР-азами плазматической мембраны и эндоплазматического ретикулума, установлена отрицательная и положительная кооперативность связывания нуклеозидтрифосфата с Са2+-АТР-азой плазматической мембраны и эндоплазматического ретикулума соответственно. Однако оказалось, что низкоаффинные центры обеих Са2+-АТР-аз характеризируются некооперативным связыванием Са2+, тогда как высокоаффинные – положительной кооперативностью. В координатах Хилла рассчитаны значения констант Михаэлиса по Mg2+ для Са2+-АТР-аз плазматической мембраны (3,89 · 10-5) и эндоплазматического ретикулума (3,80 · 10-5 М). Предполагается, что полученные результаты представляют интерес для дальнейшего изучения молекулярных и мембранных механизмов регуляции внутриклеточной кальциевой сигнализации и секреции клетками слюнных желез.


Отримано: 2004-04-24

Опублiковано на сайтi: 2004-12-12